Les bases des cultures de lyophilisation (lyophilisation)
La lyophilisation, également connue sous le nom de lyophilisation, est un procédé utilisé pour préserver la matière biologique en éliminant l'eau de l'échantillon, ce qui implique d'abord de congeler l'échantillon puis de le sécher sous vide à très basse température. Les échantillons lyophilisés peuvent être stockés beaucoup plus longtemps que les échantillons non traités.
Pourquoi la lyophilisation est utilisée
La lyophilisation, ou la lyophilisation des cultures bactériennes , stabilise les cultures pour un stockage à long terme tout en minimisant les dommages qui peuvent être causés par un séchage strict de l'échantillon.
De nombreux micro-organismes survivent bien lorsqu'ils sont lyophilisés et peuvent être facilement réhydratés et cultivés dans des milieux de culture, après des périodes de stockage prolongées.
La lyophilisation est également utilisée dans les industries biotechnologiques et biomédicales pour préserver les vaccins, les échantillons de sang, les protéines purifiées et d'autres matériels biologiques.
Cette procédure de laboratoire courte peut être utilisée avec n'importe quel lyophilisateur disponible dans le commerce pour préserver votre collection de culture.
Le processus de lyophilisation
Le processus de lyophilisation est en fait une application d'un phénomène physique appelé sublimation: la transition d'une substance d'un état solide à un état gazeux, sans passer d'abord par la phase liquide. Pendant la lyophilisation, l'eau contenue dans l'échantillon congelé est éliminée sous forme de vapeur d'eau, sans d'abord décongeler l'échantillon.
Erreurs courantes
L'une des erreurs les plus courantes en matière de lyophilisation est de ne pas connaître le point de fusion de votre échantillon, ce qui rend difficile le choix du bon lyophilisateur.
Vos échantillons peuvent fondre pendant le processus. Une autre erreur fréquente est de penser que le refroidissement est meilleur quand on lyophilise sur un lyophilisateur à plateaux. Pendant le séchage primaire, vous devez régler la température de l'étagère juste en dessous de la température eutectique de l'échantillon. Il devrait y avoir juste assez de chaleur pour encourager les molécules de l'échantillon à bouger - mais empêcher la fusion.
Une troisième erreur consiste à utiliser le mauvais équipement pour vos échantillons. Parce que les lyophilisateurs sont utilisés en groupe, vous devriez savoir ce qui suit avant d'en acheter un:
- Quelle quantité d'humidité sera lyophilisée
- Quel est l'échantillon (et la température eutectique)
- Comment utiliser correctement le lyophilisateur
Si l'appareil n'est pas utilisé correctement, il risque de détruire tous les échantillons. Ce qui nous amène à une autre erreur commune: Ne pas maintenir la pompe à vide. La pompe doit être en excellent état de fonctionnement pour que la lyophilisation fonctionne. Faire fonctionner la pompe avec le ballast à gaz ouvert 30 minutes avant et après le processus de lyophilisation augmentera la durée de vie de la pompe. L'ouverture du ballast d'essence élimine les contaminants de la pompe pour éviter d'endommager les composants internes. Vous devez vérifier souvent l'huile de la pompe pour la décoloration et les particules, et changer l'huile si nécessaire. Des changements d'huile réguliers maintiennent la pompe à un niveau de vide optimal pendant le processus de lyophilisation.
Enfin, avoir les mauvais accessoires de lyophilisation pour votre processus de lyophilisation peut aussi être une grosse erreur. Avez-vous besoin d'un échantillon de bouchon sous votre aspirateur? Ensuite, une chambre d'arrêt est nécessaire. Est-ce que vous lyophilisez dans des flacons? Assurez-vous ensuite d'avoir une chambre de séchage avec des ports.
En évitant les erreurs ci-dessus, vous pouvez mieux prendre soin de votre lyophilisateur et de votre pompe, et avoir de meilleurs échantillons lorsque votre lyophilisation est effectuée.
Les références
Nouvelles de Labconco. "Top 5 des erreurs faites dans le processus de lyophilisation." http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes