Le tampon au citrate de sodium est utilisé pour l'isolement de l'ARN car il minimise l'hydrolyse de base des brins d'ARN. Ceci en fait une étape importante dans la purification de l'ARNm pendant la recherche génomique ou pour l'étude de la transcription.
Les tampons à base de citrate peuvent également aider à la détection d'antigènes dans des préparations de tissus fixes car ils rompent les liaisons transversales formées entre les antigènes et les milieux de fixation.
Avec le guide ci-dessous, faites un tampon de citrate de sodium de pH 6. Les instructions sont non seulement faciles mais rapides à exécuter aussi. Cela ne devrait vous prendre que 10 minutes pour terminer ces étapes.
Deux options pour faire le tampon
Il y a deux façons de fabriquer un tampon de citrate de sodium. D'abord, déterminez si vous avez à la fois l'acide citrique et la base conjuguée, le citrate de sodium, pour travailler avec. Si vous n'avez que de l'acide citrique, ce n'est pas un problème. Vous pouvez toujours faire le tampon.
D'un autre côté, si vous avez à la fois l'acide et la base, créez une solution mère de chacun. Mélanger 21 grammes d'acide citrique dans 1 litre d'eau distillée et 29,4 grammes de citrate de sodium dans 1 litre d'eau distillée.
Si vous n'avez que de l'acide citrique, mélanger 2,1 grammes dans un peu moins de 1 litre d'eau distillée et passer à l'étape suivante.
Mélange de solutions d'acide citrique et de citrate de sodium
Maintenant que vous avez créé votre solution mère (si vous aviez à la fois un acide et une base) ou mélangé votre acide dans de l'eau distillée (si ce n'est pas le cas), vous pouvez vous concentrer sur vos solutions.
Mélanger 82 millilitres de la solution d'acide citrique avec 18 millilitres de la solution de citrate de sodium.
Ensuite, faites le volume total du mélange jusqu'à un peu moins de 1 litre avec de l'eau distillée. Laisser suffisamment de volume pour permettre l'ajout d'hydroxyde de sodium (NaOH) dans l'étape suivante.
Ajuster le pH
Tout en agitant doucement la solution à l'aide d'un agitateur magnétique, utiliser de l'hydroxyde de sodium 1 M pour ajuster le pH du mélange à 6,0. Après cela, faire le volume final de la solution jusqu'à 1 litre avec de l'eau distillée en utilisant une fiole jaugée.
Qu'est-ce que vous devez faire le tampon
Non seulement cela ne vous prendra pas très longtemps pour faire le tampon de citrate de sodium, mais vous n'aurez pas non plus besoin de beaucoup de matériaux pour cela. Avec de l'acide citrique, 1 M d'hydroxyde de sodium, de l'eau distillée et une sonde de pH étalonnée, vous serez à mi-chemin. L'utilisation du citrate de sodium est facultative.
La fabrication du tampon nécessitera également un cylindre gradué de 1 litre, un flacon volumétrique de 1 litre et trois flacons de 1 litre. Enfin, vous aurez besoin d'une barre d'agitation magnétique et d'un agitateur magnétique.
Si vous n'avez pas tous ces documents, pensez à utiliser le laboratoire dans votre école ou sur votre lieu de travail, vous n'avez donc pas besoin de les acheter vous-même. Vous pouvez également facilement acheter ces documents en ligne ou visiter un magasin de produits spécialisés dans votre région.